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Volumen
11 - Nº 64 Agosto/septiembre 2001
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Observación tridimensional
La nueva era
en la microscopía de fluorescencia
Javier F. Adur, Fernando D. Balducci, Juan C. García,
José F. Vilá, Ma. Fernanda Izaguirre y Víctor H. Casco
Laboratorio de Microscopía, Facultad de Ingeniería
– Bioingeniería, Universidad Nacional de Entre Ríos
La observación de sustancias fluorescentes mediante el microscopio óptico junto a los avances tecnológicos de los microscopios y de las computadoras, han dotado a los biólogos de procedimientos que permiten estudiar cada vez con más detalle y precisión la distribución en el espacio y en el tiempo de componentes celulares, complementando y ampliando de modo espectacular la información proporcionada por los métodos tradicionales de microscopía óptica y electrónica.
La información sobre la estructura tridimensional de los componentes biológicos es un recurso esencial para las biologías molecular y celular. La combinación de la microscopía óptica con técnicas de fluorescencia permite obtener esta información, haciendo posible el estudio de la distribución espacial y temporal de componentes específicos en el interior de una célula.
En el curso de la última década, la microscopía de fluorescencia convencional aprovechó el aumento de la memoria y la velocidad de procesamiento de las computadoras. Esto, junto al desarrollo de sistemas de registro digital de imágenes de alta calidad, de fuentes de iluminación láser potentes y estables, de sistemas ópticos corregidos y de nuevas moléculas fluorescentes capaces de marcar procesos celulares específicos, han dado lugar a novedosas técnicas tales como la Microscopía de Desconvolución Digital (MDD), la Microscopía Láser Confocal (MLC) y la Microscopía de Excitación Bifotónica (M-2F). Estos nuevos procedimientos permiten obtener imágenes tridimensionales de procesos y de la distribución de moléculas específicas en células vivas, utilizando técnicas no invasivas.
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